Тема 3 токсикология карбамида

Работа 1. Токсическое действие аммиака

Материальное оснащение: белая мышь, раствор аммиака (1 мл аммиака в 10 мл воды), колпак стеклянный, шприц на 1 мл, игла, пинцет.

Ход опыта. У белой мыши сосчитать число дыханий за одну ми­нуту и определить состояние болевой чувствительности путем нажима пинцетом на кончик хвоста. Затем ввести внутрибрюшинно 0,3 мл раствора аммиака. Описать изменения в клиническом состоянии жи­вотного. Сделать вывод о характере действия аммиака на центральную нервную систему.

Работа 2. Антидотная терапия приотравлении аммиаком

Материальное оснащение: две белые мыши одинаковой массы, раствор аммиака (1 мл аммиака в 10 мл воды), смесь раствора аммиака (1 мл аммиака в 5 мл воды) с раствором формальдегида (1 мл 40%-ного раствора формальдегида в 5 мл воды), два колпака стек­лянных, шприц, зонд металлический, пинцет.

Ход опыта. Взять двух белых мышей одинаковой массы. У каж­дой из них сосчитать число дыханий за одну минуту и определить состояние болевой чувствительности путем нажима пинцетом на кончик хвоста. Затем первой мыши ввести внутрь через зонд 0,3 мл раствора аммиака, второй - раствор аммиака, но с добавлением фор­мальдегида. Протокол вести по схеме:

Сделать вывод об антидотном действии формальдегида при отрав­лении аммиаком. Какое соединение образуется в результате взаимо­действия аммиака и формальдегида.

Работа 3. Метод определения карбамида (качественная реакция)

ПРОБА С КОНЦЕНТРИЮВАННОЙ АЗОТНОЙ КИСЛОТОЙ

Материальное оснащение: водная вытяжка из корма, азотная кислота, часовое стекло, глазные пипетки 2 шт.

Ход опыта К капле водной вытяжки из корма прибавить 1-2 кап­ли концентрированной азотной кислоты. При наличии карбамида вы­кристаллизовывается его азотная соль в виде шестигранных или ром­бических пластинок, лежащих преимущественно кучками или чере-пицеообразно. Сделать заключение о наличии или отсутствии карб­амида в корме.

Работа 4. Качественное определение карбамида в корме

Материальное оснащение: корм, содержащий карбамид, пробир­ка с пробкой, лакмусовая бумажка красная, горелка, реактив Миллона.

Ход опыта Корм, содержащий карбамид, помещают в широкую пробирку, которую неплотно закрывают пробкой с укрепленной на ней красной лакмусовой бумажкой так, чтобы она не касалась стенок про­бирки. Пробирку с кормом нагревают над пламенем горелки до появ­ления белого дыма. В присутствии карбамида красная лакмусовая бу­мажка синеет (образование аммиака). Объяснить принцип метода.

РЕАКЦИЯ ПО АРХАНГЕЛОВУ

К большой капле водного раствора карбамида прибавляют ма­ленькую каплю реактива Миллона. Выпадает белый осадок - двойная соль ртути и карбамида и одновременно выделяются пузырьки газа. Осадок постепенно перекристализовывается, образуя кристаллы в виде шляпок грибов, которые при длительном отстаивании частично пре­вращаются в звездчатые скопления и розетки из ромбов и паралле­лограммов. Чувствительность 0,5 мг. Продолжительность реакции око­ло 30 мин.

Работа 5. Экспресс-метод количественного определения карбамида в кормах и содержимом рубца

Материальное оснащение: водная вытяжка из содержимого руб­ца, спирт этиловый подкисленный - 20 мл, 5%-ный раствор фенола -20 мл, стандартный раствор карбамида - 50 мл (содержащий 1 мг карбамида в 1 мл), кислота соляная - 10 мл, 2,5%-ный раствор кальция гипохлорита - 50 мл, штатив, пробирки - 6 шт., пипетка на 3 мл - 3 шт., пипетка на 1 мл - 3 шт.

Принцип метода. Метод основан на способности водно-спирто­вого раствора мочевины взаимодействовать в присутствии фенола и соляной кислоты с гипохлоритом кальция. При этом появляется спе­цифическое окрашивание. Интенсивность окраски зависит от концент­рации мочевины в растворе. Метод специфичен и обладает большой чувствительностью.

Подготовка материала к исследованию. Навеску корма или содержимого рубца в количестве 50 г заливают 300 мл дистилли­рованной воды, размешивают в течение 30 мин, фильтруют и отстаи­вают. Из верхнего слоя берут пипеткой 1 мл жидкости, переносят в мерную колбу на 50 мл и доводят до метки водой.

Ход опыта Для анализа берут 1 мл жидкости из колбы, переносят в колориметрическую пробирку, сюда же добаляют 3 мл подкислен­ного спирта, 0,5 мл 2,5%-ного раствора кальция гипохлорита и 0,5 мл 5%-ного раствора фенола. Пробирку встряхивают. Указанная последо­вательность внесения реактивов обязательна. Таким же образом гото­вят пробирку с контрольной пробой.

Количество карбамида определяют по колориметрической шкале, которую готовят вместе с испытуемой и контрольной пробами. Для приготовления колориметрической шкалы готовят сначала стандарт­ный раствор карбамида, содержащий 1 мг мочевины в 1 мл, путем растворения 50 мг в 50 мл спирта.

Для построения колориметрической шкалы из стандартного рас­твора карбамида готовят серию растворов, с содержанием карбамида в первой пробирке 20 мкг, во второй - 40 мкг, в третьей 60 мкг, в четвертой и пятой - 80 и 100 мкг соответственно. Затем, в каждую пробирку вносят до объема 3 мл спирт,подкисленный соляной кис­лотой, по 0,5 мл раствор кальция гипохлорита и по 0,5 мл раствор фенола. Пробирки встряхивают. Колориметрирование проводят через 20 мин после внесения последнего реактива в опытные и контрольные пробирки. Расчет ведут по формуле:

где / - количество испытуемой жидкости, взятое для исследования; 50 - количество разведенного испытуемого раствора, мл (в чис­лителе); 300 - количество жидкости, используемой для экстрагирования

карбамида из навески, мл; 1000 - пересчет на 1кг корма или содержимого рубца;

А - количество карбамида в пробирке стандартной шкалы,

соответствующей по цвету испытуемому раствору; 50 - навеска корма или содержимого рубца, взятых для анализа (в знаменателе).

Задание по фармакотерапии

Выписать в рецептах и объяснить действие препаратов:

1. Корове - 10%-ный раствор натрия глутамата.

2. Овце - средство для ослабления и снятия тетанических судорог.

3. Быку - средство, изменяющее реакцию содержимого рубца в кислую сторону и понижающее активность уреазы.

4. Корове - антидот при отравлении мочевиной.

5.10 овцам - средство для стимуляции сердечной деятельности. 6. Рассчитать потребность в молочной кислоте для 10 коров при отравлении карбамидом.

Вопросы программированного контроля

I. Аммонийные соединения, используемые для удобрения почвы. 1. Аммония хлорид. 2. Аммония карбонат. 3. Нашатырный спирт.

4. Аммония сульфат. 5. Аммония нитрат. 6. Карбамид. 7. Аммония би­карбонат. 8. Аммиачная вода.

П. Указать аммонийное соединение, применяемое в медицине и ветеринарии в качестве отхаркивающего средства.

1. Аммония хлорид. 2. Аммония гидрокарбонат. 3. Карбамид.

III. Какое количество карбамида следует добавлять в рацион мо­лодняка крупного рогатого скота старше б месяцев (на голову в сутки)?

а) при выращивании 1) 50-90 г 2) 40-50 г

б) при откорме 1) 50-90 г 2) 40-50 г

IV. Какие животные более чувствительны к избыточным дозам карбамида.

1. Истощенные. 2. Упитанные. 3. Голодные. 4. Накормленные.

5. В рационе которых преобладают легко переваримые углеводы.

6. В рационе которых преобладают грубые малопитательные корма.

V. Отметить основные клинические признаки, характерные для острого отравления карбамидом.

1. Угнетение. 2. Испуг. 3. Расслабление мускулатуры. 4. Судороги клонико-тонического характера. 5. Сухость слизистых оболочек. 6. Саливация. 7. Атония рубца. 8. Усиление сокращений рубца.

VI. Лекарственные вещества, применяемые при остром отравле­нии карбамидом.

1. Натрия гидрокарбонат. 2. Натрия карбонат. 3. Кислота уксус­ная. 4. Кислота молочная. 5. Глюкоза. 6. Формалин. 7. Натрия глутамат.