Соматотропный гормон (стг) в сыворотке
Таблица 9.2. Содержание СТГ в сыворотке в норме
Возраст | Норма, нг/мл |
Кровь из пуповины | 10-50 |
Новорожденные | 10-40 |
Дети | 1-10 |
Взрослые: |
|
мужчины | До 2,0 |
женщины | До 10,0 |
Старше 60 лет: |
|
мужчины | 0,4-10,0 |
женщины | 1-14 |
Повышенное выделение СТГ отмечается при физической работе, во время глубокого сна. Продуцирование и секреция СТГ регулируется двумя пептидами гипоталамуса: сомато-либерином, который стимулирует продуцирование СТГ, и соматостатином, оказывающим обратное действие.
Суточный ритм секреции СТГ с пиками его концентрации выше 6 нг/мл через 1—3 ч после засыпания независимо от времени суток формируется к 3 мес после рождения. Среднесуточная концентрация СТГ повышается в период полового созревания, снижается после 60 лет; к этому же времени исчезают суточные ритмы. Половых различий в секреции СТГ нет. Спонтанная суточная секреция СТГ у детей в норме и при различных заболеваниях представлена на рис. 9.1.
По данным Martha и соавт. (1992), скорость секреции СТГ у детей:
от 3 мес до 10 лет — 13—20 мкг/кг за 24 ч;
11 — 15 лет — 32—61 мкг/кг за 24 ч;
16—18 лет — 11—24 мкг/кг за 24 ч.
Средняя амплитуда пиков содержания СТГ в крови от 7 до 23 нг/мл (11 — 15 нг/мл), частота — 1,3—4,5 (2—3) в час. Имеется положительная корреляция между скоростью роста детей и среднесуточной концентрацией СТГ.
Экскреция СТГ с мочой. Это исследование имеет преимущества по сравнению с определением суточного ритма пиков концентрации СТГ в крови, так как не требует частого забора крови у пациента. Экскреция СТГ с мочой у здоровых детей значительно превышает таковую у пациентов с дефицитом СТГ и идиопатической задержкой роста. Ночная экскреция СТГ с мочой тесно коррелирует с суточной экскрецией (табл. 9.3), в связи с чем целесообразно исследовать только утреннюю порцию мочи. Параллельно с определением СТГ в моче необходимо исследовать и уровень креатинина.
Таблица 9.3. Нормальная экскреция СТГ с мочой у детей
Возраст, годы | СТГ в моче, нг/г креатинина | |
ночная экскреция | суточная экскреция | |
1-8 9-18 | 7,5—42 (средняя 18) 6,7—39 (средняя 15) | 10,2-30,1 (средняя 15,8) 9,3-29 (средняя 16,2) |
399
10 12 14 16 18 20 22 24 2 4 6
СТГ, нг/мл
20--
10--
2 4 6
СТГ, нг/мл
20--
0 в 8
Ч Ч f-
10 12 14 16 18 20 22 24 2 4 6
Время суток
СТГ, нг/мл II
Время суток
Рис. 9.1. Колебания содержания СТГ в крови у детей по K.S. Wikland, S. Roswerg (1983).
а — здоровые дети; б — полный дефицит СТГ; в — частичный дефицит СТГ; г — повышенная секреция СТГ при гигантизме.
Повышение содержания СТГ в сыворотке крови наблюдается главным образом при акромегалии и гигантизме (СТГ-продуцирующей аденоме гипофиза). Основным в лабораторной диагностике гигантизма и акромегалии является определение уровня СТГ в сыворотке крови натощак (среднее значение трехкратных определений в течение 2—3 дней). Уровень СТГ в крови больных повышается, достигая иногда 400 нг/мл (в 2—100 раз выше средней величины). При близких к нормальным уровням содержания СТГ в крови натощак, для подтверждения диагноза и установления фазы заболевания (активная или неактивная) необходимо исследовать суточный ритм секреции СТГ, а также провести ряд физиологических и фармакологических тестов. При большинстве болезней из-за недостаточности секреции СТГ суточный ритм колебаний содержания СТГ отсутствует. Для уточнения диагноза содержание СТГ в сыворотке исследуют с интервалом 1—2 мес. Важную информацию дает проба с ТРГ. В норме ТРГ не влияет на секрецию СТГ, однако у больных с акромегалией введение ТРГ в 90 % случаев существенно увеличивает содержание СТГ в крови. При акромегалии определение СТГ в сыворотке крови в динамике заболевания необходимо для оценки эффективности консервативной терапии и радикальности хирургического лечения. Медикаментозная терапия акромегалии считается адекватной в случае, если уровень СТГ не превышает 10,0 нг/мл.
Эффективная гамма- или протонотерапия приводит к нормализации концентрации СТГ в крови. Результат гамма-терапии оценивают не ранее чем через 2 мес, а протонотерапии — через 4 мес по окончании лечения. Радикально проведенная операция также способствует нормализации содержания СТГ в течение нескольких дней. Полноту удаления соматотропи-номы оценивают с помощью глюкозотолерантного теста с исследованием содержания СТГ в сыворотке крови натощак, а также через 1 и 2 ч после приема глюкозы. Снижение уровня СТГ в ходе теста до 2,5 нг/мл и ниже свидетельствует о радикально проведенной аденомэктомии.
Пониженное выделение СТГ в период роста вызывает карликовость. При гипофизарном нанизме секреция СТГ снижена, суточный ритм секреции отсутствует. Если в пробе, взятой натощак, содержание СТГ превышает 10 нг/мл, его недостаточность может быть исключена. При более низких показателях содержания СТГ в сыворотке крови необходима дополнительная лабораторная диагностика. Проводят различные диагностические пробы, поскольку нижняя граница нормы СТГ в крови близка к пределу чувствительности метода. При выявлении недостаточности СТГ функциональные и фармакологические пробы позволяют исследовать его гипофизарный резерв и установить место локализации дефекта.
Тесты на стимуляцию секреции СТГ (инсулиновый, аргининовый, тест с L-ДОФА) при гипопитуитаризме с поражением гипоталамо-гипофизарной области отрицательные, т.е. содержание СТГ в сыворотке крови в ходе проб не изменяется или незначительно возрастает, не достигая 10,0 нг/мл, уровень СТГ ниже 7—10 нг/мл после двух провокационных проб подтверждает диагноз его недостаточности. У больных с нанизмом Ларона базальный уровень СТГ повышен и все динамические тесты положительные, т.е. уровень СТГ в ходе пробы превышает 10,0 нг/мл или возрастет в несколько раз по сравнению с фоном.
Тесты с СТРГ, ТРГ и с другими тестами помогают установить локализацию поражения в гипоталамо-гипофизарной системе. Если имеется положительная реакция на СТРГ, ТРГ и отрицательная на инсулиновую гипогликемию, то можно предположить наличие очага поражения на уровне гипоталамуса. Отсутствие реакции на СТРГ, ТРГ и инсулиновую гипогликемию свидетельствует о первичном поражении гипофиза.
Уровень СТГ в крови может снижаться у детей с первичным гипотиреозом. Успешное лечение гипотиреоза приводит к нормализации уровня СТГ. Заболевания и состояния, при которых может изменяться содержание СТГ в крови, представлены в табл. 9.4.
Таблица 9.4. Состояния, влияющие на содержание СТГ в крови
Увеличение концентрации | Снижение концентрации |
Акромегалия и гигантизм | Гипофизарная карликовость |
Голодание, стресс, алкоголизм | Гиперкортицизм |
Хроническая почечная недостаточность | Тучность |
Посттравматические и постоперационные состояния | Химио- и радиотерапия |
Порфирия, гипергликемия | Оперативные вмешательства |
Эктопическая продукция опухолями желудка, легких | Синдром Иценко—Кушинга |
Гиперпитуитаризм | Факторы, вызывающие гипергликемию |
Физическая нагрузка | Гипопитуитаризм |
26-5812
401
Продолжение табл. 9.4
Увеличение концентрации | Снижение концентрации |
АКТГ, вазопрессин, эстрогены, норадреналин, дофамин, серотонин, клонидин, пропранолол, альфа-до-фа, бромкриптин, аргинин, инсулин, витамин РР, амфетамин | Анэнцефалия у плода Прием препаратов: прогестерон, глюкокорти-коиды, изопротеренол, метисегрит, фенотиа-зин, соматостатин, глюкоза |
- Глава 1. Гематологические исследования
- Глава 2. Цитохимические исследования
- Глава 3. Общеклинические исследования
- Глава 4. Биохимические исследования
- Глава 5. Система гемостаза
- Глава 6. Лекарственный мониторинг
- Глава 7. Иммунологические исследования
- Глава 8. Серологические исследования
- Глава 9. Гормональные исследования
- Глава 10. Реологические свойства крови и их значение в клинической практике
- Кровь Общеклиническое исследование крови
- В норме [Тиц II., 1997]
- 1. Тромбоцитопении, связанные со снижением образования тромбоцитов (недостаточность кроветворения).
- Лейкоцитарная формула крови
- Базофилы
- Лимфоциты
- Содержания лимфоцитов
- Изменения размера
- Изменения формы
- Включения в эритроцитах
- Ядросодержащие клетки эритроцитарного ряда
- Скорость оседания эритроцитов (соэ)
- Ретикулоциты
- Время свертывания крови (по Сухареву)
- Длительность кровотечения (по Дуке)
- Плазмодии малярии в крови
- Осмотическая резистентность эритроцитов
- Серповидные эритроциты в крови
- Эритроцитометрия
- Пунктат костного мозга Миелограмма
- Иммунный агранулоцитоз
- Лейкемоидные реакции
- Лейкемоидные реакции лимфатического и моноцитарного типа
- Острые лейкозы
- Эритремия
- Хронический лимфолейкоз
- Цитохимическая характеристика клеток крови и костного мозга в норме
- Активность миелопероксидазы
- Активность щелочной фосфатазы
- При различных заболеваниях
- Активность кислой фосфатазы
- Активность альфа-нафтилацетатэстеразы
- Активность альфа-нафтилацетатэстеразы с фторидом натрия
- Активность нафтол-а8-ацетатэстеразы
- Активность нафтол -as - d -хлорацетатэстеразы
- Активность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы
- Гликоген в клетках
- Липиды в клетках
- Сидероциты и сидеробласты
- М оча Общеклиническое исследование мочи
- Химическое исследование
- Причины увеличения выделения уробилиногена с мочой
- Белок в суточном количестве мочи
- Глюкозурический профиль
- Проба по Адцису—Каковскому
- Проба по Нечипоренко
- Проба по Зимницкому
- Стаканные пробы
- Общеклиническое исследование жидкости из плевральной полости и перикарда
- Бактериоскопическое исследование жидкости из плевральной полости и перикарда
- Общеклиническое исследование жидкости из брюшной полости
- [Каль л., 1995]
- Пунктаты кистовидных образований
- Мокрота Общеклиническое исследование мокроты
- Волокна
- Спирали и кристаллы
- Бактериоскопическое исследование мокроты
- Исследование мокроты методом флотации
- [Черняев л.А., 1996]
- Слизь из носа
- Спинномозговая жидкость Общеклиническое исследование спинномозговой жидкости
- Спинномозговая жидкость при менингитах
- Спинномозговая жидкость при закрытой черепно-мозговой травме
- Спинномозговая жидкость при геморрагическом инсульте
- Бактериоскопическое исследование спинномозговой жидкости
- Желудочное содержимое Общеклиническое исследование желудочного содержимого
- Дуоденальное содержимое Общеклиническое исследование дуоденального содержимого
- Микроскопическое исследование желчи
- Общеклиническое исследование кала
- Копрограмма в норме
- Копрограмма при патологии
- Скрытая кровь в кале
- Яйца глистов в кале
- Простейшие в кале
- Соскоб с перианальных складок на энтеробиоз
- Общеклиническое исследование отделяемого из влагалища
- Тумилович л.Г., 1995]
- Общеклиническое исследование отделяемого из цервикального канала
- Общеклиническое исследование секрета предстательной железы
- Микроскопическое исследование
- Кожа и ногтевые пластинки Общеклиническое исследование содержимого пузырей при дерматозах
- Исследование ресничек и содержимого розовых угрей на демодекоз
- Б елки и белковые фракции Общий белок в сыворотке
- Альбумин в сыворотке
- Белковые фракции сыворотки
- Альбумин в моче
- Специфические белки
- Кислый альфа- 1-гликопротеин в сыворотке
- Альфа-1-антитрипсин в сыворотке
- Белок сывороточного амилоида а
- Гаптоглобин в сыворотке
- Альфа-2-макроглобулин в сыворотке
- Витамин-а-связывающий белок в сыворотке
- И хирургических вмешательств
- Цистатин с в сыворотке
- Витамин в12 в сыворотке
- Показатели азотистого обмена Мочевина (азот мочевины) в сыворотке
- Мочевина (азот мочевины) в моче
- Креатинин в сыворотке
- Креатинин в моче
- Клиренс эндогенного креатинина (проба Реберга—Тареева)
- Мочевая кислота в сыворотке
- Мочевая кислота в моче
- Аммиак в сыворотке
- Гомоцистеин в сыворотке
- Молекулы средней массы в крови
- Молекулы средней массы в моче
- Глюкоза в крови
- Глюкоза в спинномозговой жидкости
- Гликемический профиль
- Глюкозотолерантный тест
- Гликозилированный гемоглобин в крови
- Фруктозамин в сыворотке
- Молочная кислота (лактат) в крови
- Пировиноградная кислота (пируват) в сыворотке
- Липиды, липопротеины и аполипопротеины
- Общие липиды в сыворотке
- Общий холестерин (хс) в сыворотке
- Альфа-холестерин (лпвп-хс) в сыворотке
- Лпвп-хс [Климов а.Н., 1984]
- Лпвп-хс
- Бета-холестерин (лпнп-хс) в сыворотке
- Электрофоретический анализ липопротеинов
- Типирование дислипопротеинемий
- Липонротеин(а) в сыворотке
- Общие фосфолипиды в сыворотке
- Неэстерифицированные (свободные) жирные кислоты (нэжк) в сыворотке
- Показатели пигментного обмена Образование желчных пигментов
- Общий билирубин в сыворотке
- Прямой билирубин в сыворотке
- Непрямой билирубин в сыворотке
- Желчные кислоты в сыворотке
- Ферменты и изоферменты
- Аспартатаминотрансфераза (act) в сыворотке
- Аланинаминотрансфераза (алт) в сыворотке
- Общая лактатдегидрогеназа (лдг) в сыворотке
- Щелочная фосфатаза в сыворотке
- Лейцинаминопептидаза (лап) в сыворотке
- Сорбитолдегидрогеназа (сдг) в сыворотке
- Глутаматдегидрогеназа (ГлДг) в сыворотке
- Холинэстераза (хэ) в сыворотке
- Альфа-амилаза в сыворотке и моче
- Альфа-амилаза в содержимом брюшной полости
- Панкреатическая альфа-амилаза в сыворотке и моче
- Липаза в сыворотке
- Трипсин в сыворотке
- Панкреатическая эластаза-1 в сыворотке
- Панкреатическая эластаза-1 в кале
- Кислая фосфатаза в сыворотке
- Глютатионпероксидаза (гп) в крови
- Маркеры повреждения миокарда
- Общая креатинкиназа (кк) в сыворотке
- Миоглобин в сыворотке
- Тропонин т в сыворотке
- Тропонин I в сыворотке
- Изофермент лдг-1 в сыворотке
- Маркеры повреждения мозговой ткани Белок s-100 в сыворотке
- Водно-электролитный обмен Калий в сыворотке
- Натрий в сыворотке
- Калий в эритроцитах
- Натрий в эритроцитах
- Калий в спинномозговой жидкости
- Натрий в спинномозговой жидкости
- Калий в моче
- Натрий в моче
- Повышено
- Общий кальций в моче
- Неорганический фосфор в сыворотке
- Неорганический фосфор в моче
- Магний в сыворотке
- Хлор в сыворотке
- Гипохлоремия
- Хлор в спинномозговой жидкости
- Хлор в моче
- Типовые нарушения осмотического гомеостаза
- I. Нарушения, связанные с увеличением содержания основных осмотически активных веществ в плазме:
- III. Нарушения, связанные с водным дисбалансом:
- IV. Смешанные нарушения
- Нарушения, связанные с водным дисбалансом
- Смешанные нарушения осмобаланса
- Клиническое применение осмометрии
- Показатели кос
- Формы нарушений кос
- Диагностика дыхательной недостаточности
- Показатели метаболизма железа Железо в сыворотке
- [Авцын а.П., 1990]
- Общая железосвязывающая способность сыворотки
- Ферритин в сыворотке
- Микроэлементы Медь в сыворотке
- [Авцын а.П., 1990]
- Цинк в сыворотке
- [Авцын а.П., 1990]
- Кобальт в сыворотке
- [АвцынА.П., 1990]
- Марганец в крови
- Хром в крови
- Молибден в сыворотке
- Ванадий в крови
- Селен в крови
- Кремний в сыворотке
- Никель в сыворотке
- Оценка первой фазы плазменного гемостаза — образования протромбиназы
- Оценка второй фазы плазменного гемостаза — образования тромбина
- Тромбиновое время
- Антитромбин III (at III)
- Тромбогеморрагических осложнений
- Г л а в а 6 лекарственный мониторинг
- Гентамицин в сыворотке
- Амикацин в сыворотке
- Ванкомицин в сыворотке
- Дигоксин в сыворотке
- Дигитоксин в сыворотке
- Фенобарбитал в сыворотке
- Теофиллин в сыворотке
- Хинидин в сыворотке
- Новокаинамид в сыворотке
- Лидокаин в сыворотке
- Литий в сыворотке
- Гуморальный иммунитет
- IgA в сыворотке
- IgM в сыворотке
- IgG в сыворотке
- Заболеваниях
- Ревматических заболеваниях
- Иммуноэлектрофорез белков сыворотки крови
- Иммуноэлектрофорез белков мочи
- Криоглобулины в сыворотке
- Клеточный иммунитет
- Натуральные киллеры (cd 16) в крови
- Трансформация лимфоцитов
- Агломерация лейкоцитов крови
- Организма
- Фагоцитоз
- Активность нейтрофилов
- Лизоцим в крови
- Система комплемента
- Цитокины
- При иммунодефицитах
- Фенотипирование гемобластозов
- Титр антител к нуклеарным антигенам (антинуклиарный фактор) в сыворотке
- Ревматоидный фактор (рф) в сыворотке
- Антистрептолизин-0 (асло) в сыворотке
- Синдрома
- Антикардиолипиновые антитела в сыворотке
- Волчаночный антикоагулянт в плазме
- Диагностика аутоиммунных заболеваний
- [Лукьянчиков b.C. И др., 1995]
- Диагностика аутоиммунных заболеваний щитовидной железы
- Диагностика аутоиммунных повреждений поджелудочной железы
- Диагностика аутоиммунных повреждений надпочечников
- Исследование онкомаркеров
- Альфа-фетопротеин (афп) в сыворотке
- Карбогидратный антиген са-19-9 в сыворотке
- Карбогидратный антиген са-72-4 в сыворотке
- Раковый антиген са-15-3 в сыворотке
- Бета-2-микроглобулин в сыворотке и моче
- Диагностика сифилиса
- С результатами риф
- Антигенами
- Серологическая диагностика вирусных инфекций
- Спид-индикаторные болезни
- Антитела к вич в сыворотке
- В сыворотке
- Вирусные гепатиты
- Вирусный гепатит а
- Вирусный гепатит в
- Вирусный гепатит с
- Вирусный гепатит d
- Вирусный гепатит е
- Цитомегаловирусная инфекция
- Герпетическая инфекция
- Вирусный паротит
- Ветряная оспа
- Краснуха
- Аденовирусная инфекция
- Респираторно-синцитиальная инфекция
- Инфекционный мононуклеоз
- Серологическая диагностика бактериальных инфекций
- Инфекции, вызываемые стафилококками
- Инфекции, вызываемые пневмококками
- Инфекции, вызываемые гемофильной палочкой
- Менингококковая инфекция
- Бруцеллез
- Сальмонеллезная инфекция
- Туберкулез
- Дифтерия
- Антитела к дифтерийному токсину в сыворотке
- Легионеллез
- Иерсиниоз
- Псевдотуберкулез
- Хеликобактериоз
- Хламидийная инфекция
- Микоплазменная инфекция
- Гонорея
- Амебиаз
- Токсоплазмоз
- Криптоспоридиоз
- Серологическая диагностика паразитарных инфекций Эхинококкоз
- Токсокароз
- Пневмоцистоз
- Серологическая диагностика грибковых инфекций Аспергиллез
- Кандидоз
- Обнаружение вируса гепатита с
- Обнаружение вируса гепатита в
- Обнаружение цитомегаловируса
- Обнаружение вируса папилломы человека
- Обнаружение микобактерий туберкулеза
- Обнаружение Helicobacter pylori
- Обнаружение гонококков
- Обнаружение микоплазм
- Обнаружение Chlamidia trachomatis
- Г л а в а 9 гормональные исследования
- Гормоны гипоталамуса
- Гормоны гипофиза
- Регуляция секреции гормонов гипоталамуса и гипофиза
- Лабораторная диагностика
- Соматотропный гормон (стг) в сыворотке
- Соматомедин с (см) в сыворотке
- Функциональное состояние
- Системы
- Кортизол в сыворотке
- Свободный кортизол в моче
- И установление его этиологии
- Кортикостероидсвязывающий глобулин (ксг) в сыворотке
- Функциональное состояние щитовидной железы
- Биосинтез и метаболизм гормонов щитовидной железы
- Метаболический эффект гормонов щитовидной железы
- Тиреотропный гормон (ттг) в сыворотке
- Общий трийодтиронин (тз) в сыворотке
- Концентрация тз
- Общий тироксин (т4) в сыворотке
- Свободный трийодтиронин (сТз) в сыворотке
- Свободный тироксин (сТ4) в сыворотке
- Тиреоглобулин (тг) в сыворотке
- Кальцитонин (кт) в сыворотке
- Эутиреоидный (нетоксический) зоб
- Гипотиреоз
- Гипертиреоз (тиреотоксикоз)
- Тиреоидиты
- [Гончаров н.П., 1995]
- Рак щитовидной железы
- Функциональное состояние репродуктивной системы
- Гонадотропин-рилизинг гормон
- Гонадотропины
- Лютеинизирующий гормон (лг) в сыворотке
- Пролактин в сыворотке
- Ингибин в сыворотке
- Активин в сыворотке
- Фоллистатин в сыворотке
- Половые стероиды
- Эстрадиол в сыворотке
- Тестостерон в сыворотке
- Гормоны плаценты
- Гормональная регуляция сперматогенеза
- Первичная аменорея
- I. Гипергонадотропный гипогонадизм.
- II. Гипогонадотропный гипогонадизм.
- III. Эугонадальный гипогонадизм.
- IV. Гиперандрогенемия.
- Гипогонадотропный гипогонадизм
- Вторичная аменорея
- Яичниковая гиперандрогенемия
- Надпочечниковая гиперандрогенемия
- Климактерический синдром
- Антидиуретический гормон в плазме
- Функциональное состояние ренин - ангиотензин - альдостероновой системы
- В плазме
- Эндотелии в плазме
- Мелатонин в сыворотке
- Функциональное состояние гормональных систем регуляции обмена кальция
- Маркеры метаболизма и резорбции костной ткани
- Пиридинолин (Пид) и дезоксипиридинолин (Дпид) в моче
- Функциональное состояние симпатикоадреналовой системы
- Адреналин и норадреналин в моче
- Общие метанефрины в моче
- Общие норметанефрины в моче
- Ванилилминдальная кислота в моче
- Инсулин в сыворотке
- Инсулина в крови
- Проинсулин в сыворотке
- Глюкагон в плазме
- Соматостатин в плазме
- Панкреатический пептид (пп) в сыворотке
- Рецепторы к инсулину
- Инкреторная функция желудочно-кишечного тракта
- Гастрин в плазме
- Секретин в плазме
- Серотонин в сыворотке
- Гистамин в сыворотке
- Синдром множественных эндокринных неоплазий
- Эритропоэтин в сыворотке
- Альфа-фетопротеин (афп) и свободный хорионический гонадотропин (хг) в сыворотке (тест на врожденные пороки развития цнс)
- Неонатальный тиреотропный гормон — hTsh (тест на врожденный гипотиреоз)
- Исследование крови на фенилкетонемию
- Исследование крови на галактоземию
- Кровообращение в сосудах зоны микрогемоциркуляции и его связь с системной гемодинамикой
- Система микрогемоциркуляции (структура и функции)
- Реометрия крови
- Исследование процесса агрегации форменных элементов крови
- Общие закономерности расстройств микрогемоциркуляции
- Феномен внутрисосудистой агрегации форменных элементов крови
- Синдром повышенной вязкости крови
- Сосудов
- 214000, Г. Смоленск, проспект им. Ю. Гагарина, 2.