3 Технология получения растительных полифенолов

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и может быть использовано для получения растительных полифенолов, обладающих гепатозащитным действием. Кроме гепатозащитного, полифенолы обладают желчегонным действием и способностью понижать содержание билирубина в крови больных вирусным гепатитом. Известен способ получения гепатозащитного препарата силибора, заключающийся в экстракции семян расторопши пятнистой 80%-ным спиртом с последующим упариванием и растворением остатка 50%-ным метанолом. Раствор обрабатывают четыреххлористым углеродом, затем смесью хлороформэтанол. Органическую фазу упаривают, сушат и получают целевой продукт с выходом 4,5 - 5,0% по сырью. Однако данный способ предполагает использование высокотоксичных растворителей, а получаемый продукт значительно уступает по ряду фармакологических показателей препарату, получаемому по заявленному способу. Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату является способ получения растительных полифенолов, обладающих гепатозащитным действием, из ядровой древесины маакии амурской. Согласно известному способу сырье экстрагируют 95%-ным спиртом при 50 - 55oC в соотношении сырье : экстрагент - 1: 5, трехкратным настаиванием в течение трех суток (243 ч), остаток после упаривания объединенного экстракта разбавляют водой и очищают тяжелым петролейным эфиром или хлористым метиленом в соотношении водный остаток : растворитель 3-4:1, а целевой продукт экстрагируют этилацетатом или бутанолом. К недостаткам известного способа, выявленным при его многократном осуществлении, относятся следующие. Требуется глубокая отгонка спирта от первичных суммарных экстрактов для успешного проведения экстрагирования малополярным растворителем (удаление липидов) и, особенно, этилацетатом (получение целевого продукта), чтобы отделение растворителя от водной фазы происходило полно и экстракция проходила эффективно. Практическое же осуществление способа показало, что при глубокой отгонке спирта часть активных полифенолов маакии амурской выпадает в осадок, загрязняет дистилляционную аппаратуру и требует периодической ее очистки, что связано с потерей части целевого продукта, дополнительным расходом спирта и простоем аппаратуры. Использование хлористого метилена (и других хлорированных растворителей с удельным весом более 1) также при этом становится невозможным из-за образования неразделимых суспензий этого тяжелого растворителя с выпавшим осадком. Применение же петролейного эфира - легко воспламеняющегося и взрывоопасного растворителя, требует создания специальных технологических условий и мер по обеспечению пожарной безопасности, что вызывает значительное удорожание целевого продукта. Далее, получение целевого продукта из освобожденных от липидов водно-спиртовых растворов достигается экстрагированием его этилацетатом, также пожароопасным при его использовании и регенерации. Отгонка этого растворителя от полифенолов маакии сопровождается выпадением части их в осадок, бурным вскипанием растворителя и перебросами, что в высшей степени затрудняет осуществление данной операции. Задача изобретения - простым и экономичным способом получить препарат, обладающий равным гепатозащитным действием при наличии дополнительных форм фармакологической активности. Задача решена тем, что в способе получения растительных полифенолов, обладающих гепатозащитным действием, путем экстракции измельченной ядровой древесины маакии амурской 95%-ным спиртом при 50 - 55oC в соотношении сырье: экстракт - 1:5 и выделения целевого продукта, экстракцию осуществляют в батарее перколяторов, затем спиртовое извлечение упаривают и сушат в вакууме. Заявляемый способ обладает следующими преимуществами перед известным: во-первых, он более экономичный, так как экстрагирование сырья в батарее перколяторов требует меньшего расхода растворителя и энергетических затрат; во-вторых, он более простой, так как не производится очистка спиртового извлечения малополярными растворителями от примесей липидов, а также освобождение целевых веществ от водорастворимых компонентов путем экстракции этилацетатом; в-третьих, дополнительными фармакологическими и клиническими испытаниями у полученного предлагаемым способом суммарного извлечения обнаружено желчегонное действие, а также способность понижать уровень билирубина в крови больных, перенесших вирусный гепатит. Возможность использования в качестве гепатозащитного средства суммарного спиртового извлечения не могла предвидеться заранее и требовала специальных доказательств. Известны многочисленные способы получения из растительного сырья полифенолов подобного типа действия. Однако, наличие в растительном материале как малополярных (липиды, смолы, воски, стерины), так и полярных нефенольных компонентов (алкалоиды, сапонины), соизвлекаемых вместе с полифенолами спиртом или ацетоном, приводит к необходимости усложнять технологический процесс. Неполярные компоненты, не обладая выраженным гепатозащитным действием, и присутствие в сырье в значительных количествах, могут разубоживать активные части экстракта, снижая его фармакологическую активность. Липидные компоненты растений обычно содержат полиненасыщенные жирные кислоты и глицериды, их включение в целевой продукт может вызвать понижение его стабильности из-за склонности таких липидов к пероксидации. Среди водорастворимых полярных компонентов, соизвлекаемых с полифенолами спиртом, часто оказываются токсические примеси (например, алкалоиды), из-за чего полифенольный целевой продукт селективно экстрагируют из раствора подходящим органическим растворителем, не смешивающимся с водным спиртом. Учитывая все вышеизложенное, сравнительному фармакологическому исследованию были подвергнуты два препарата: сумма полифенолов, полученная из ядровой древесины маакии амурской в точном соотношении со способом-прототипом, и суммарное спиртовое извлечение, полученное по заявленному способу, т.е. без последующего сольвентного фракционирования. Для установления стабильности (сроков годности) оба препарата были заложены на хранение в условиях, предусмотренных Государственной Фармакологией. Через промежутки времени в них методом ВЭЖХ устанавливалось количественное содержание важнейших компонентов, определяющих гепатозащитную активность. Эти опыты также показали отсутствие каких-либо отличий в стабильности препаратов. Таким образом было подтверждено, что специальное удаление липидных и водорастворимых компонентов экстрактов ядровой древесины маакии амурской, в отличие от экстрактов из травянистого лекарственного сырья, не повышает заметным образом гепатозащитного действия полифенольного комплекса и не отражается на биологической активности и токсичности целевого продукта. Экспериментально установлено наличие у спиртового извлечения, полученного заявленным способом, нового ценного фармакологического свойства - активного желчегонного действия. Ограниченные клинические испытания на больных добровольцах, страдающих вирусным гепатитом с устойчивым повышенным уровнем билирубина в крови, выявили способность нового препарата быстро снижать этот уровень до нормы.