Билет №89 «Высокоэффективная жидкостная хромотография»

высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) осуществляется с использованием приборов - хроматографов. Форма проведения процесса - на колонках.В основе разделения веществ методом ВЭЖХ лежит обратимая сорбция вещества между жидкостью, подаваемой в колонку под высоким давлением, и твёрдой фазой колонки.

характеристики ВЭЖХ

Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) является вариантом жидкостной колоночной хроматографии. Неподвижная фаза - твёрдый сорбент, подвижная – жидкость, подаваемая в колонку под повышенным давлением. Разделение компонентов смеси достигается за счёт различия в сродстве компонентов смеси к неподвижной и подвижной фазам. Основное требованиями в методе является растворимость исследуемых веществ в подвижной фазе, а также свойство удерживаться неподвижной фазой. Основными узлами хроматографа для ВЭЖХ являются: насос высокого давления для подачи подвижной фазы; устройство для ввода пробы (дозатор); хроматографическая колонка; детектор с регистрирующим устройством.

В качестве сорбента в ВЭЖХ обычно используют силикагель с гидро-ксилированной поверхностью или с привитыми к поверхности различными функциональными группами,

Принцип анализа в ВЭЖХ. Анализируемую смесь растворяют в подвижной фазе и с помощью дозатора или микрошприца вводят в специальное устройство прибора. на колонке происходит разделение смеси. Чем больше сродство компонента к неподвижной фазе и чем меньше к подвижной, тем медленнее он движется по колонке и тем дольше он в ней удерживается.Анализ проводится в определённом режиме температур, что создаётся с помощью устройства для термостатирования.Сорбент, состав подвижной фазы, скорость подачи подвижной фазы, давление, температурный режим, объём вводимой пробы устанавливаются для данной конкретной пробы. Наиболее распространёнными приборами в ВЭЖХ являются хроматографы серии "Милихром".