logo
Immunologia_1

57. Реакция иммунофлюоресценции (риф,методКунса)

Этот метод используется для экспресс-диагностики. С его помо- щью можно выявлять как микробные антигены, так и антитела.

Прямойметод РИФ — иммунная реакция взаимодействия анти- тел с антигенами, причем антитела метят флюорохромом — ве- шеством, способным при попадании света определенной длины волны испускать кванты света также определенной длины волны. Особенность постановки этого метода заключается в необходимо- сти удаления непрореагировавших компонентов, чтобы исключить выявление неспецифического свечения. Для этого проводят от- мывание от непрореагировавших антител. Результаты оценивают с помощью люминесцентного микроскопа. Бактерии в мазке, обра- ботанные такой люминесцирующей сывороткой, светятся на тем- ном фоне по периферии клетки.

Непрямой метод РИФ используется чаще-предыдущего. Эта реакция проводится в два этапа. На первом этапе антигены взаимодейстиуют с соответствующими антителами, образуя иммунные комплексы. Все компоненты, которые не прореагировали (т.е. не в составе иммунных комплексов), должны быть удалены отмывани- ем. На втором этапе образовавшийся комплекс антиген—антитело выявляется с помощью флюорохромированной антиглобулино- вой сыворотки. В результате образуется комплекс микроб + анти- микробные кроличьи антитела + антитела к иммуноглобулинам кролика, меченные флюорохромом. Результаты оценивают с по- мощью люминесцентного микроскопа.