logo
Анализ качественных и количественных характеристик антибиотиков

1. Качественное определение антибиотиков

Задача качественно определить неизвестный антибиотик встаёт как при изучении новых антибиотиков, так и в практике, если нужно показать присутствие антибиотика в фармацевтических препаратах. Обе задачи требуют совершенно различных методов. Самым надёжным методом идентификации антибиотика является определение его инфракрасного спектра. Результаты здесь абсолютно однозначны. Только после измерения инфракрасного спектра можно с полной уверенностью судить об отличии или идентичности двух антибиотиков различного происхождения. Поскольку инфракрасным спектрофотометром оснащена не каждая лаборатория, то для идентификации антибиотиков были разработаны системы простых химических реакций, довольно надёжных для идентификации известных антибиотиков.

Для быстрого качественного определения антибиотиков в фармацевтических препаратах очень удобна осциллографическая полярография. При хорошо подготовленной аппаратуре можно за несколько минут идентифицировать большинство ныне применяемых антибиотиков. Практически наиболее важным являются разграничение тетрациклиновых антибиотиков от хлорамфеникола, а также проверка состояния и чистоты пенициллиновых препаратов, причём важно быстро установить, до какой степени препарат разложился. Другим быстрым физическим методом идентификации антибиотиков является определение показателя преломления твёрдого вещества. В табл. 2 приведены величины показателей преломления для обычно применяемых антибиотиков в твёрдом состоянии.

Таблица 1 Перечень химических тестов для качественного определения антибиотика

Бацитрацин

Фумагиллин

Карбомицин

Эритромицин

Грамицидин

Тиротрицин

Полимиксин В

Виомицин

Неомицин

Тетрациклин

Окситетрациклин

Хлортетрациклин

Хлорамфеникол

Дигидрострептомицин

Стрептомицин В

Стрептомицин А

Эфинамн-пенициллин

Прокаин-пенициллин

Пенициллин G (К-соль)

Тест

+

+

+

Гидроксиламин+FeCl3

+

+

Мальтольная реакция (на стрептозу)

+

+

+

+

Реакция Эльсона ? Моргана (на глюкозамин)

+

+

+

+

Тест с реактивом Вебера (на гуанидиновую группу)

+

+

+

+

Нингидриновая реакция

+

+

Диазотация

+

+

Тест с реактивом Эрлиха (пара-диэтиламино-бензальдегидом)

+

+

Ацетон+HCl

+

Ванилин+HCl

+

+

+

+

+

Биуретовая реакция

красный

красный

фиолет.

Концентрированная H2SO4

+

Ацетон+H2SO4

+

+

+

Флюоресценция в ультрафиолетовом свете

Таблица 2 Индексы преломления некоторых антибиотиков в твёрдом состоянии, определённые методом погружения

Антибиотик

Пенициллин-калиевая соль

Прокаинпенициллин

Стрептомицин-сульфат

Стрептомицин-хлоргидрат

Хлортетрациклин-хлоргидрат

Окситетрациклин-хлоргидрат

Бацитрацин

Полимиксин В (сульфат)

Эритромицин

1,57?1,58

1,57?1,58

1,55

1,56

1,66?1,67

1,55?1,56

1,54?1,55

1,53

1,45?1,47

Практическую ценность представляет разница между показателем преломления хлортетрациклина и окситетрациклина, на основе которой можно эти два антибиотика различить. Очень специфическими являются микробиологические методы идентификации антибиотиков. Для этого применяются штаммы, специфически резистентные к данному антибиотику, или же так называемые зависимые штаммы, т.е. такие, рост которых обусловлен присутствием определяемого антибиотика. Этот метод особенно надёжен, однако изыскание или выведение таких штаммов является обычно очень трудоёмким делом.