logo
Методички НормФиз 2 курс / Metodichki / Методички / Кровь / Лабораторные

3. Подсчет эритроцитов

Камеру кладут на предметный столик микроскопа, установленный горизонтально, и приступают к подсчету эритроцитов при малом увеличении микроскопа (объектив 8x, окуляр 10x или 15x). Поле зрения должно быть затемнено диафрагмой и несколько опущенным конденсатором. Подсчитывают эритроциты в 5 больших квадратах, разделенных на 16 малых (всего в 5 x 16 = 80 малых квадратах), расположенных по диагонали. Во избежание двукратного подсчета клеток, лежащих на границах квадратов руководствуются правилом Егорова: считают эритроциты, находящиеся внутри квадрата и на его верхней и левой границах.

Подсчитав, таким образом, сумму эритроцитов в 5 больших квадратах (т.е. в 80 малых), находят среднее арифметическое число эритроцитов в одном малом квадрате - Э/80. Зная, что объем пространства камеры над одним малым квадратом равен 1/4000 мм3, умножают найденное число на 4000. Получают число эритроцитов в 1 мкл разведенной крови. Умножив на кратность разведения (200), рассчитывают количество эритроцитов в 1 мкл цельной крови.

Таким образом, формула для вычисления количества эритроцитов следующая:

Х = (А 4000 200) / 80,

где Х - искомое число эритроцитов в 1 мкл крови;

А - число эритроцитов в 80 малых квадратах;

1/4000 мм3 - объем разведенной крови над одним малым

квадратом;

80 - число малых квадратов;

200 - степень разведения.

Полученное число эритроцитов умножают на 106 и получают содержание клеток в 1 литре крови.

Ошибка метода составляет 2-3%.

Возможные источники ошибок при подсчете эритроцитов:

  1. Образование сгустка во время взятия и разведения крови.

  2. Несоблюдение условий, обеспечивающих должную высоту камеры (неправильный выбор покровного стекла и плохое его прижатие к камере).

  3. Проведение подсчета сразу после заполнения камеры, когда клетки еще не распределились равномерно и не осели.

  4. Попадание воздуха в капилляр с кровью.

Оформление протокола. Указать чем разводится кровь для подсчета эритроцитов и почему. Написать формулу подсчета эритроцитов, провести ее анализ – описать значение всех цифр в формуле. Нарисовать фрагмент сетки Горяева, указать площадь малого квадрата и объем крови над ним. Начертить пять больших квадратов, указать подсчитанное количество эритроцитов в них. Записать нормальные значения количества эритроцитов у мужчин, женщин (новорожденных).

Вывод. Сравнить полученный результат с нормой.