5.8.6. Кокаин

Изолирование. 5 мл крови экстрагируют 15 мл н-бутилхлорида. Органическую фазу отделяют, добавляют к ней 10 мл 0,1 М НCl, встряхивают в течение 5 мин. Отделяют водную фазу (органическую отбрасывают) и приливают к ней 10 %-ный раствор аммиака до рН 10. В делительную воронку помещают подщелоченную водную фазу и дважды экстрагируют по 5 мл хлороформом. Объединенный хлороформный экстракт упаривают до объёма 0.5 мл в токе теплого воздуха.

50 мл мочи подкисляют HCl до рН 2 и экстрагируют 50 мл эфира для удаления кислых и нейтральных соединений. Кокаин и его метаболиты остаются в основном в водной фазе. Водную фазу подщелачивают 25 %-ным раствором аммиака до рН 10. Экстракцию производят равным объемом смеси хлороформ: изопропанол (3:1) дважды. Объединенный экстракт упаривают досуха.

Хроматографическая очистка и обнаружение. Сухой остаток растворяют в 0,2 мл хлороформа и половину объема наносят на стартовую линию пластинки ВЭТСХ. В качестве метчиков используют смесь кокаина и бензоилэкгонина. Хроматографируют в системе хлороформ – метанол (50:50). Длина пробега – 10 см.

Реагенты, используемые для проявления пластинки:

Сначала пластинку опрыскивают реактивом Драгендорфа, затем иодплатинатом . Идентификацию проводят по совпадению величин Rf исследуемых соединений и метчиков. При положительной пробе оставшуюся аликвоту раствора хроматографируют в системе этилацетат – метанол (80:20)и проводят микрокристаллоскопические реакции.

Микрокристаллоскопические реакции.

1. Реакция с раствором платинохлористоводородной кислоты.

Соединяют на предметном стекле капли исследуемого раствора и 10 %-ный раствора платинохлористоводородно кислоты. Из концентрированных растворов соли кокаина сразу же выпадают перистые дендриты, а из разбавленных – кристаллы в виде штыков. Предел обнаружения – 3 мкг кокаина.

2. Реакция с раствором калия перманганата.

К крупинке хлористоводородной соли кокаина прибавляют на предметном стекле каплю 1 %-ного раствора калия перманганата. При потирании стеклянной палочкой в области исследуемой капли и добавлении реактива выделяются красно-фиолетовые прямоугольные и квадратные пластинки. Предел обнаружения - 4 мкг.