5.8.9. Промедол

Изолирование. 50 мл мочи доводят до рН 11-13 0,1 М раствором NaOH и трижды экстрагируют хлороформом по 45, 40 и 25 мл. Объединенные хлороформные извлечения фильтруют через фильтр, смоченный хлороформом и органический растворитель удаляют в испарительной чашке досуха.

Хроматографическая очистка и обнаружение. Сухой остаток растворяют в хлороформе. Полученный раствор делят на две равные части. На стартовую линию хроматографической пластинки с закрепленным слоем силикагеля наносят в две полосы экстракты 1 и 2 и рядом раствор метчика (стандартный раствор промедола основания в хлороформе). В качестве подвижной фазы используют хлороформ, который помещают в камеру объемом 500 см3, на дно которой помещается бюкс или тигель, содержащий 5 мл 25 %-ного раствора аммиака. Насыщают в течение 30 минут. Длина пробега – 10 см.

Реагенты, используемые для проявления пластинки:

Одну из зон опрыскивают реактивом Драгендорфа. При наличии промедола наблюдается оранжевое пятно.

Во второй зоне и зоне метчика промедол обнаруживается капельно с помощью реактива Марки (пурпурно-красное окрашивание). Предел обнаружения – 0,25 мкг.

М икрокристаллическая реакция с ализариновым красным.

Оранжевое пятно, полученное после обработки реактивом Драгендорфа, снимают с помощью скальпеля в пробирку, содержащую 5 мл смеси этанола -25 %-ного раствора аммиака (9:1). После встряхивания смеси в течение 1 минуты полученный раствор отделяют фильтрованием через стеклянный фильтр. Растворитель удаляют, а остаток переносят с помощью хлороформа на предметное стекло. К сухому остатку добавляют 1 каплю 0,1 М раствора HCl и вносят 1-2 кристалла красителя ализаринового красного. При наличии промедола (через 5-10 минут) образуются игольчатые кристаллы желтого цвета.