6. Определение осмотической устойчивости эритроцитов.

Основано на оценке степени гемолиза в гипотонических растворах хлорида натрия, в которых происходит набухание и гемолиз эритроцитов. Выделяют 2 вида осмотической устойчивости эритроцитов: максимальная 0,28-0,32 % NaCl (разрушаются молодые эритроциты); минимальная 0,44-0,48 % NaCl (разрушаются старые эритроциты). Если границы сдвигаются в сторону максимальной устойчивости, то в периферической крови преобладают молодые эритроциты; если к минимальной устойчивости, то старые (кроветворение ослаблено).

ЦЕЛЬ: освоить методику определения осмотической устойчивости эритроцитов.

ОСНАЩЕНИЕ: дефибринированная кровь, штатив для пробирок, 10 пробирок, восковой карандаш, пипетка, стеклянная палочка, растворы хлорида натрия убывающей концентрации.

ХОД РАБОТЫ: предварительно готовят рабочие растворы натрия хлорида различной концентрации от 0,15 до 0,6%. Рабочие растворы натрия хлорида разливают по 5 мл в 10 центрифужных пробирок. В каждую добавляют по 3-5 капель дефибринированной крови. Пробирки оставляют на 1 час при комнатной температуре, а затем центрифугируют 5 мин при 2000 об/мин. Надосадочную жидкость из каждой пробирки исследуют на фотоэлектроколориметре. Определяют процент (степень) гемолиза, приняв за 100% гемолиз в пробирке с 0,15% раствором натрия хлорида. Гемолиз можно определять и визуально по цвету надосадочной жидкости. При его отсутствии наблюдается бесцветный раствор и большое количество осадка. При частичном гемолизе - появление окраски надосадочной жидкости (розовение) и уменьшение осадка. При полном гемолизе эритроцитов - интенсивная красно-лаковая окраска надосадочной жидкости и отсутствие осадка.

Частичный гемолиз характеризуется окрашиванием раствора и появлением осадка неразрушенных эритроцитов. Начало гемолиза (минимальная его степень) определяется по легкому порозовению (при визуальном определении гемолиза количество рабочего раствора в пробирке должно быть меньше 1,0 мл). Бесцветный раствор и большое количество осадка свидетельствуют об отсутствии гемолиза.

Определить, при какой концентрации раствора хлорида натрия наступает гемолиз и сделать вывод об осмотической устойчивости исследованных эритроцитов.

2-е практическое занятие. Форменные элементы крови.

Физиологическая характеристика эритроцитов. Понятие об эритроцитозе и эритропении, анизоцитоз, пойкилоцитоз.

Гемоглобин, его виды и соединения, возрастные изменения, физиологическое значение. Цветовой показатель.

Физиологическая характеристика лейкоцитов. Лейкоцитарная формула и её клиническое значение. Понятие о лейкоцитозе и лейкопении. Изменение картины периферической крови при физических нагрузках.

Кроветворение, регуляция.

Методы подсчёта форменных элементов в камере Горяева.

Вопросы программированного контроля по теме занятия.

1. Сколько эритроцитов в одном литре крови: у мужчин, у женщин?

2. Какие функции выполняют эритроциты, что для них характерно?

3. Что такое эритроцитоз, эритропения?

4. Что характеризует кривая Прайс-Джонса? Что такое микроцитоз, макроцитоз,

анизоцитоз, пойкилоцитоз?

5. Какие методы используются для определения количества эритроцитов?

6. Какие из указанных величин соответствуют содержанию гемоглобина в крови женщин,

мужчин?

7. Что характерно для гемоглобина плода, новорожденного, взрослого?

8. Соединения гемоглобина.

9. Чему равен цветной показатель и о чём он говорит? Как определяется?

10. Какие функции выполняют лейкоциты? Сколько их в одном литре крови?

11. Что такое лейкоцитоз и лейкопения? Причины их вызывающие?

12. Какие лейкоциты относятся к гранулоцитам и к агранулоцитам?

13. Каковы функции базофилов, эозинофилов, нейтрофилов, моноцитов, лимфоцитов?

Каково их % содержание?

14. Как определяется лейкоцитарная формула? Причины её сдвига вправо, влево?

15. В каких случаях будет меняться соотношение зрелых и молодых нейтрофилов?

16. Что характерно для процесса кроветворения (гемопоэза), в каких органах он

протекает? Что характерно для костного мозга, его функции?

17. Какие факторы поддерживают эритроцитарное равновесие в организме?

18. Каковы свойства стволовой полипотентной клетки, частично детерминированной

клетки, унипотентной клетки?

19. Какие функции выполняет микрососудистый компонент короткоранговой регуляции

кроветворения?

20. Какие факторы могут принимать участие в специфической дальноранговой регуляции

гемопоэза?

21. Какие факторы участвуют в неспецифической регуляции гемопоэза?