Морфологические изменения криосохраненных аллографтов

Юдин П. Ю., Черняк А. Л.

Научные руководители: к.м.н. О. А. Юдина, к.м.н. С. В. Спиридонов

Учреждение образования

«Белорусский государственный медицинский университет»,

Учреждение здравоохранения

«Городское клиническое патологоанатомическое бюро»,

РНПЦ «Кардиология»

г. Минск, Республика Беларусь

Введение

Современным направлением в хирургическом лечении поражений клапанного аппарата является использование криосохраненных аллографтов, которое открывает новые горизонты в реконструктивной кардиохирургии. Как показал многолетний опыт их применения, аллогенные клапаны адекватно корректируют внутрисердечную гемодинамику, снижают риск тромбоэмболических осложнений, не требуют пожизненной антикоагулянтной терапии, улучшают качество жизни оперированных больных. Появление в последние годы современных криогенных технологий позволило создать условия для длительного сохранения жизнеспособности биологических объектов, что обеспечивает их нормальную функцию в организме после имплантации.

Цель исследования

В рамках комплексной оценки качества изготавливаемых криосохраненных аллогенных кондуитов выявить их морфологические изменения.

Материалы и методы исследования

Использовали гистологические срезы, взятые из различных участков тканей аллографтов до и после процедуры криосохранения/размораживания. Для этого отбирали участки стенки синусов Вальсальвы ниже линии синотубулярного соединения, а также полулунные заслонки аортального клапана, которые помещали в 10 % раствор нейтрального формалина для фиксации. После обезвоживания образцов в тканевом процессоре, заливали их по стандартной схеме в блоки «Гистамиксом», делали срезы и исследовали при световой микроскопии с увеличением «50» и «100». Препараты окрашивали гематоксилином и эозином, MSB, орсеином на эластические волокна. В качестве контроля использовали образцы тканей аллографтов подверженных стерилизации без криосохранения.

Результаты и обсуждение

По данным световой микроскопии аллографтов после их криосохранения установлены изменения всех слоев синусов Вальсальвы: истончение меди за счет ее эластического каркаса, в котором выявляли очаговый гиперэластоз, набухание, мультипликацию, расщепление, фрагментацию эластических волокон и множественные микроскопические кистозные полости. Последние были представлены гроздевидными структурами с базофильным содержимым при окраске гематоксилином и эозином. В артериальном слое синусов определялись нарушения подобные изменениям медии.

Спонгиозный слой был утолщен преимущественно в основании заслонок за счет увеличения содержания основного вещества, а в свободном крае указанные изменения были не характерны. В восходящем отделе аорты и устьях коронарных артерий была изменена структуры интимы. В ней наблюдались очагово-диффузные уплотнения, в которых преобладало межуточное вещество, богатое гликозаминогликанами, а волокнистые структуры были немногочисленные и фрагментированные. Морфологические признаки нарушения проницаемости эндотелия: вакуолизация цитоплазмы, истончение ее периферических отделов и базальной мембраны, расширение межклеточных щелей, свидетельствовали об изменениях метаболизма стенки и активации пролиферации клеток фибропластического ряда. Встречались участки, на которых отсутствовала эндотелиальная выстилка. В единичных полях зрения отмечался отек и множественные разрывы эластических волокон.

Выводы

Таким образом, криоконсервация аллографтов незначительно влияет на их структуру, однако не вызывает выраженных изменений в гистологическом строении.