9.4. Исследование веществ основного характера в общих системах растворителей.

Подвижная фаза: хлороформ: диоксан: ацетон: аммиак = 45:47,5:5:2,5

Неподвижная фаза: силикагель.

Схема разметки пластинки:

Зона А - наносим метчики (атропин, кокаин).

Зона Б - 1/25 часть хлороформного экстракта из щелочной среды.

Зона В - стандарт (этаперазин) для расчета значений R_st.

Зона Г - 1/10 часть хлороформного экстракта из щелочной среды.

После хроматографирования вещества основного характера распределяются по вертикальным зонам следующим образом:

I зона - пахикарпин, морфин, атропин, эфедрин, стрихнин, хинин, кодеин, дионин (R_f= 0,12-0,36).

II зона - этаперазин, антипирин, кофеин (R_f= 0,5-0,58).

III зона - хлордиазепоксид, дипразин, новокаин, тиоридазин, аминазин, промедол, нитразепам, амидопирин (R_f= 0,63-0,83).

IV зона - левомепромазин, папаверин, диазепам, кокаин (R_f= 0,87-0,98).

Обнаружение соединений на хроматограмме производится путем последовательной обработки слоя сорбента зон А, Б, В следующими реагентами:

• 10% раствор FeCl₃ - производные пиразолона и фенотиазина;

• конц. HClO₄+ 3-5% раствор NaNO₂ - усиление окраски фенотиазинов;

• 10% раствор H₂SO₄ + УФ-свет - хинин;

• реактив Драгендорфа по Мунье и 10% раствор H₂SO₄ (для усиления окраски) - все соединения, содержащие третичный атом азота.

Слой сорбента из зоны Г, расположенный параллельно окрашенному пятну в зоне Б, снимают и экстрагируют смесью метанол-диэтиламин= 9:1 (для I зоны) и смесью метанол:25% раствор NH₃ = 9:1 (для II-IV зоны). Экстракты хроматографируют в частных системах.

9.5. ТСХ-скрининг веществ основного характера в частных системах.

Нанесение на пластинку проводится как и в случае исследования веществ кислого характера.

Соединения I зоны (пахикарпин, морфин, атропин, эфедрин, стрихнин, кодеин, дионин).

1. Подвижная фаза - хлороформ-диэтиламин= 9:1.

2. Сорбент - силикагель КСК (закрепленный слой).

3. Реагенты:

• реактив Драгендорфа по Мунье – проявляются вещества, содержащие третичный атом азота;

• реактив Марки - производные фенантренизохинолина;

• 10% раствор H₂SO₄+ УФ-свет (хинин).

Соединения II зоны (этаперазин, антипирин, кофеин).

1. Подвижная фаза - ацетон-хлороформ = 1:5.

2. Сорбент - незакрепленный слой нейтрального оксида алюминия.

3. Реагенты:

• конц. HClO₄+3-5% раствор NaNO₂ - этаперазин (розовая окраска);

• 10% раствор FeCl₃ - антипирин (оранжево-коричневая окраска).

Соединения III зоны (дипразин, новокаин, тиоридазин, аминазин, промедол, нитразепам, амидопирин).

1. Подвижная фаза - хлороформ-этанол = 20:1.

2. Сорбент - незакрепленный слой основного оксида алюминия.

3. Реагенты:

• 10% раствор FeCl₃ - амидопирин (фиолетовая окраска);

• конц. HClO₄+3-5% раствор NaNO₂ - дипразин, аминазин (розовое окрашивание), тиоридазин (зеленое окрашивание);

• реактив Марки - промедол (розовое окрашивание);

• реакция азосочетания - новокаин;

• гидролиз с последующим азосочетанием – хлозепид, нитразепам.

Соединения IV зоны (левомепромазин, папаверин, диазепам, кокаин).

1. Подвижная фаза - циклогексан-ацетон = 5:1.

2. Сорбент - незакрепленный слой основного оксида алюминия.

3. Реагенты:

• конц. HClO₄+3-5% раствор NaNO₂ - левомепромазин (фиолетовое окрашивание);

• реактив Марки - папаверин (розовое окрашивание);

• реактив Драгендорфа - диазепам (желто-оранжевое окрашивание), кокаин (оранжево-коричневое окрашивание).

Следует отметить, что предварительное исследование методом ТСХ-скрининга особенно эффективно при анализе секционного материала, не подвергшегося гнилостному разложению, так как, в противном случае, при изолировании экстрагируется значительное количество эндогенных аминов, пептидов и других ВМС, затрудняющих проведение ТСХ-скрининга.

Известны и другие системы ТСХ- скрининга лекарственных веществ. Например, В.А. Карташов предложил систему ТСХ- скрининга более 80 лекарственных веществ основного характера.