logo search
Prakt_ch_4

Количественное определение белка в моче колориметрическим методом с пирогаллоловым красным.

Принцип метода: при взаимодействии белка с пирогаллоловым красным и молибдатом натрия образуется окрашенный комплекс, интенсивность окраски, которого пропорциональна концентрации белка в пробе.

Реактивы: Рабочий реагент – раствор пирогаллолового красного в сукцинат-ном буфере, калибровочный раствор белка с концентрацией 0,50 г/л

Ход работы:

Отмерить

Моча

Калибратор

Вода дист.

Моча

20 мкл

Калибратор

20 мкл

Вода дист.

20 мкл

Рабочий реагент

1000 мкл

1000 мкл

1000 мкл

Пробы перемешать, выдержать 10 мин. при комнатной температуре (18 -25ºС). Измерить оптическую плотность опытной (Dоп) и калибровочной пробы (Dк) против контрольной пробы при λ=598 (578-610) нм. Окраска стабильна в течении 1 ч.

Расчет: концентрацию белка в моче (С) г/л рассчитать по формуле:

С= Dоп/Dк×0,50

где: Dоп = Dк= C = г/л.

Нормальные величины: до 0,094 г/л, (0,141 г/сут)

Вывод: