logo
Ответы Общая биотехнология

3.Культивирование клеток животных.

При культивирование клеточных культур в промышленных условиях используют три различных способа репродукции вируссодержащего материала: стационарный, динамичный (роллерный), суспензионный и на микроносителях.

При стационарном способе выращивание клеточных культур производят в стеклянных матрасах емкостью 1,5л.В стерильные матрасы с питательной средой вносят необходимое количество матровой культуры клеток. Матрасы помещают в термостат. где на поверхности формируется монослой клеток, затем монослой заражается вирусом.

Культивирование клеточных культур динамическим способом осуществляется в роллерах, установленных на специальных стеллажно-ярусных аппаратах, обеспечивающих вращение, а также в аппаратах марки «Гироген». Аппарат «Гироген» состоит из большого количества стеклянных трубок, где клетки растут не только на внутренней, но и на внешней поверхности стекла. Питательная среда вносится отдельно или вместе с клеточной суспензией. Технологический процесс регулируется автоматически.

Суспензионный способ. Выращивание клеточных культур осуществляется в специальных биореакторах емкостью 1000л и более при непрерывном перемешивании(300-350 об/мин.). Культивирование осуществляется периодическим или отъмно-доливным методами.

Для повышения ростовой поверхности используют различные микроносители. В качестве микроносителей предложено использовать полые волокна в которых растущие

клетки отделены полупроницаемой мембраной полых волокон от питательной среды, а также использовать биореакторы с использованием мембранных микрокапилляров. Растущие клетки адгезированы на твердом субстрате, Используют мембраны, пропускающие вещества с малекулярной массой от 6000 до 10000 дальтон.

Способ культивирования клеток на микроносителях сочетает в себе преимущества стационарного и суспензионного способов. Культура растет на микроносителях в форме монослоя. Биореактор для культивирования оборудован устройством для мягкого перемешивания клеток и среды, ее подачи и улавливания отработанной среды через непроницаемый для клеток фильтр. Разработана специальная конструкция самовсасывающей мешалки, обеспечивающая щадящие режимы перемешивания при культивировании на микроносителях. Биореакторы снабжены системами автоматического контроля и регулирования основных параметров культивирования.