Гибридомная технология.
С помощью гибридомной (культурально-тканевые методы) технологии можно получить широкий спектр биопрепаратов и удешевить производства многих традиционных биологически активных веществ.
Гибридомные линии клеток могут выращиваться в суспензии и являются теоретически бессмертными, если они имеют субстрат для роста в непрерывной культуре в течение неограниченного периода времени. Схема получения гибридом на основе миеломных клеток и иммунных лимфоцитов включает следующие этапы:
- получение опухолевых клеток, погибающих при последующей селекции гибридомных клеток
- полечение лимфоцитов – продуцентов антител к заданным антигенам
- слияние лимфоцитов с опухолевыми клетками. Сливающим агентом служит полиэтиленгликоль или вирус Сендай, а также электрическое поле.
- скрининг гибридомных клеток. Применяют селективную среду ГАТ, содержащую гипоксантин, аминоптерин и тимидин.
- проверка способности гибридомных клеток продуцировать моноклональные антитела к заданному антигену. Для этого используют метод иммуносорбентов. Образец культуральной жидкости с гибридомными клетками вводят в реакцию с соответствующим антигеном, прочно закрепленным на носителе.
- клонирование гибридомных клеток, прошедших проверку на образование моноклональный антиген, с постоянным контролем на стабильность их иммунных свойств.
- массовое культивирование гибридомы, выделение, концентрирование и очистка продуцируемых антител.
С помощью моноклональных антител возможно также выделение белков, гормонов, токсинов из сложных смесей.
- 1.Методы биотехнологии. Биообъекты.
- 2.Культивирование микроорганизмов.
- 3.Культивирование клеток животных.
- 4.Требования к оборудованию процессов в биотехнологии.
- 5.Среды для культивирования микроорганизмов.
- 6.Аппаратурное оформление процессов приготовления питательных сред.
- 7.Очистка и стерилизация технологического воздуха.
- 8. Пенообразование и пеногашение.
- 9. Химические и механические методы пеногашения.
- 10. Контроль и регулирование концентрации водородных ионов(рН), давления, расхода воздуха на аэрацию.
- 11. Контроль и регулирование температуры, давления, расхода воздуха на аэрацию технологических процессов.
- 12. Основные параметры контроля и регулирования производства биопрепаратов.
- 13. Влияние растворимого кислорода и углекислого газа в культуральной жидкости на жизнедеятельность микроорганизмов.
- 14. Методы фильтрации культуральной жидкости.
- 15. Технологическая обвязка биореакторов
- Методы выделения и очистки при производстве биопрепаратов.
- Методы осаждения, флотирования, фильтрации.
- Методы центрифугирования, сепарирования, экстракции.
- Процессы адсорбции, кристаллизации, упаривания применяемые при выделении в биотехнологии.
- Иммобилизация биообъектов.
- Генная инженерия.
- Гибридомная технология.
- Селекция микроорганизмов.
- 24.Биотрансформация.
- 25.Иммобилизованные ферменты.
- 26.Экологическая биотехнология.
- 27.Биотехнологические процессы в пищевой промышленности.
- 28.Использование биотехнологии в сельском хозяйстве.
- 29.Медицинская биотехнология.
- 30. Производство антибиотиков