logo
Ответы Общая биотехнология

Гибридомная технология.

С помощью гибридомной (культурально-тканевые методы) технологии можно получить широкий спектр биопрепаратов и удешевить производства многих традиционных биологически активных веществ.

Гибридомные линии клеток могут выращиваться в суспензии и являются теоретически бессмертными, если они имеют субстрат для роста в непрерывной культуре в течение неограниченного периода времени. Схема получения гибридом на основе миеломных клеток и иммунных лимфоцитов включает следующие этапы:

- получение опухолевых клеток, погибающих при последующей селекции гибридомных клеток

- полечение лимфоцитов – продуцентов антител к заданным антигенам

- слияние лимфоцитов с опухолевыми клетками. Сливающим агентом служит полиэтиленгликоль или вирус Сендай, а также электрическое поле.

- скрининг гибридомных клеток. Применяют селективную среду ГАТ, содержащую гипоксантин, аминоптерин и тимидин.

- проверка способности гибридомных клеток продуцировать моноклональные антитела к заданному антигену. Для этого используют метод иммуносорбентов. Образец культуральной жидкости с гибридомными клетками вводят в реакцию с соответствующим антигеном, прочно закрепленным на носителе.

- клонирование гибридомных клеток, прошедших проверку на образование моноклональный антиген, с постоянным контролем на стабильность их иммунных свойств.

- массовое культивирование гибридомы, выделение, концентрирование и очистка продуцируемых антител.

С помощью моноклональных антител возможно также выделение белков, гормонов, токсинов из сложных смесей.