14.14.1. Функциональные и морфологические изменения, трансплантата 6 мозгу реципиента

Основная особенность, позволяющая транспланта­ту сохраняться и развиваться в мозгу реципиента, заключается в способности его тканей к регенерации и дифференциации.

После пересадки трансплантат увеличивает свои размеры, этот рост происходит активно в первые два месяца, затем размеры относительно стабилизируют­ся. Чем моложе ткань трансплантата, тем больших размеров она достигает по мере развития в ткани ре­ципиента. Пересаженная нервная ткань приживля­ется, растет, дифференцируется и сохраняется в те­чение всей жизни реципиента.

Нейроны трансплантата устанавливают эфферент­ные и афферентные связи с нейронами реципиента, эти связи могут быть специфическими и неспецифиче­скими.

Наиболее оптимально производить пересадку тогда, когда развитие эмбриона достигает уровня детермини­рованности тканей. В этом случае развитие трансплан-

тата идет по пути формирования структуры, соответ­ствующей ее происхождению, а не месту пересадки.

Следовательно, из эмбриональной ткани коры, пе­ресаженной в мозжечок, растет ткань коры, а не моз­жечка. Точно так же из ткани мозжечка, пересажен­ной в кору, возникают структуры мозжечка и специ­фичная для него морфология.

Трансплантат дифференцируется, сохраняет свои функции и биохимические свойства. Так, после пере­садки эмбриональная закладка септума, как и в нор­мально развивающемся организме, синтезирует аце-тилхолин, а закладка ядер шва серотонин. В транс­плантатах выявляются специфические для них меди­аторы, белки, ферменты. В то же время известно, что ткани реципиента могут оказывать влияние на хи­мизм прорастающих к ним нейронов.

Зачатки мозжечка, пересаженные в мозжечок дру­гого животного, развиваются в нормальный, но ма­лых размеров^:второй мозжечок.

Пересаженная структура, независимо от метода пересадки, даже в случае ее дезагригирования, вос­создает свою типовую архитектонику независимо от места трансплантации. Имеются структуры, которые нормально развиваются при пересадке их эмбриональ­ной ткани в любую структуру мозга, например, чер­ная субстанция. Моноаминергические и холинерги-ческие клетки трансплантатов устанавливают контак­ты с нейронами независимо от области транспланта­ции. В то же время неостриатум развивается только при пересадке его в неостриатум.

Пересаженная ткань сохраняет типичную для себя ультраструктуру, форму синаптических контактов, позволяющую устанавливать нормальные связи.

Таким образом, трансплантированная нервная ткань, независимо от специфической для нее сенсор-

ной и другой информации, способна дифференциро­ваться и воссоздавать структуру, присущую первона­чально эмбриональной ткани, из которой она была взята.

Между трансплантированной тканью и тканями мозга реципиента устанавливаются морфологические связи. Связи характеризуются тем, что они могут быть специфическими, неспецифическими, афферентными или эфферентными. Эти связи резко усиливаются при частичной денервации или повреждении окружающих трансплантат структур.

При пересадке септума от эмбрионов крыс в гиппо-камп, лишенный холинергической иннервации, эта иннервация восстанавливается за счет трансплантата.

Трансплантат не только восстанавливает нарушен­ную иннервацию зоны своей проекции, но и сам по­лучает иннервацию от окружающей ткани. Так, при пересадке покрышки мозга в верхние или нижние холмы среднего мозга, в трансплантат прорастали нервные волокна от холмов и распределялись здесь по типичному для холмов рисунку.

14.14.2. Функциональные связи между трансплантатом и тканями мозга реципиента

Нейроны трансплантата реагируют на антидром­ное раздражение аксонов в месте их проекции в тка­нях реципиента. Нейроны пересаженной эмбриональ­ной ткани имеют фоновую спонтанную активность с теми же характеристиками, что и нейроны этой же, но нетрансплантированной ткани. Нейроны транс­плантата коры в одноименную кору отвечают на сти­муляцию ядер таламуса точно так же, как и соседние с трансплантатом нейроны. Если стимулировать ней­роны трансплантата в коре, то нейроны других обла­стей мозга и симметричных пунктов коры реагируют

на эту стимуляцию так же, как они реагируют на сти­муляцию интактных областей коры.

Важно то, что все трансплантаты сохраняют свои свойства независимо от места трансплантации. Так, стимуляция септального трансплантата вызывает в гиппокампе реципиента холинергический эффект, как это имеет место в норме. Даже если участок эмбрио­нальной нервной ткани, принадлежащий сетчатке гла­за, пересажен в мозжечок, то его стимуляция вызы­вает реакцию нейронов двухолмия с ЛП 8-12 мс. В то же время сам пересаженный участок сетчатки при ее освещении реагировал на раздражение подобно ин-тактной сетчатке.

14.14.3. Совместимость тканей трансплантата и реципиента

Нервная ткань обладает свойствами сильного ан­тигена. В то же время нервная ткань головного моз­га, передняя камера глаза, семенники, костный мозг в определенной степени защищены от иммунной сис­темы организма. Иммунная защищенность головного мозга обусловлена тем, что гематоэнцефалический барьер препятствует клеточной иммунной реакции.

Возможно, что отсутствие иммунной реакции мозга при трансплантации обусловлено тем, что эмбриональ­ная ткань еще не сформировала антигены гистосовме-стимости, т.е. отсутствие иммунной реакции реципи­ента обусловлено отсутствием антигенов в трансплан­тате. Нужно отметить также, что эмбриональная ткань имеет высокую резистентность к различного рода воз­действиям, в частности к лишению кислорода.

Сразу после пересадки эмбриональной ткани нару­шается гематоэнцефалический барьер, что может при­вести к разрушению трансплантата. Однако в это вре-

мя еще действует его собственная резистентность к вредящим воздействиям.

По мере снижения резистентности пересаженного трансплантата восстанавливается гематоэнцефаличес-кий барьер реципиента, что, естественно, дает воз­можность пересаженной ткани приживляться в но­вой структуре.

- Следовательно, успешная трансплантация обеспе­чивается двумя механизмами. Первый заключается в том, что головной мозг является иммунологически привилегированной структурой (как и семенники, ко­стный мозг). Иммунологическая привилегированность означает, что мозг защищен гематоэнцефалическим барьером от иммунных сил организма.

Второй механизм обусловлен тем, что для пересад­ки берется эмбриональная ткань, не обладающая еще антигенными свойствами взрослого мозга. Она состо­ит из незрелых клеток и их предшественников. Эти клетки обладают гликолизом, т.е. не требуют аэроб­ного дыхания. Последнее обеспечивает пересаживае­мую нервную ткань более устойчивой к лишению кислорода при пересадке на время прорастания в нее сосудов и обеспечения ее кислородом.

Следовательно, повреждение гематоэнцефалическо-го барьера, неизбежное при пересадке, мало сказыва­ется на трансплантате, так как он состоит из еще не­зрелой ткани и не проявляет антигенных свойств. Когда же трансплантат полностью дифференцирует­ся, то к этому времени гематоэнцефалический барьер уже оказывается восстановленным.

Иммунологическая привилегированность головного мозга, лежит в основе возможности не только алло-, но и ксенотрансплантации. Вследствие этого возмож­на трансплантация от животных разного вида.

14.14.4. Трофические факторы сохранения трансплантата

Центральной нервной системе присуща нейротро-фическая функция. Каждый из отделов мозга выде­ляет свои нейротрофические вещества, которые пред­ставляют собой белки или различные пептиды.

Эти трофические вещества регулируют синтез ДНК, РНК, белка, митотическое деление клеток разных тканей, процессы роста и дифференцировки, жизне­деятельности тканей. Наличие нейротрофических ве­ществ вокруг трансплантата облегчает процесс его приживления.

Вживление трансплантата провоцирует активацию нейротрофических факторов, которые стимулируют рост и дифференцировку трансплантированной ткани.

Трофическая реакция нервной ткани не является специфичной и возникает независимо от места вжив­ления. По-видимому, для переживания пересаженной эмбриональной ткани требуется нейротрофический фактор, который представлен химическими вещества­ми, синтезирующимися в клетках места вживления трансплантата. По химической природе это пептиды, возникающие после повреждения нервной ткани, на­капливающиеся в области повреждения, в спинномоз­говой жидкости, в крови объекта и синтезирующиеся в клетках глии.

Нейроны головного мозга усиливают активность роста своего аксона, если в мозг при пересадке попа­дают швановские клетки, глия трансплантата.

14.14.5. Восстановление функций структур мозга при трансплантации

Наиболее разработан и известен опыт использова­ния метода трансплантации для восстановления фун­кции черного вещества мозга.

Стриопаллидарная система мозга имеет ряд функ­ций, среди которых — регуляция тонуса мускулату­ры для обеспечения произвольных движений. Нару­шения регуляции тонуса мускулатуры происходят в результате недостаточности дофамина, образующего­ся в черной субстанции и транспортируемого отсюда в стриопаллидарную систему.

В результате недостаточности секреции дофамина нейронами черной субстанции и транспорта его в по­лосатые тела возникает синдром паркинсонизма: тре­мор, ригидность, затруднения начала движений и т.д. Трансплантация эмбрионального участка черной субстанции по месту ее локализации или на дорсальную поверхность полосатого тела приводит к восстановле­нию связей черной субстанции с полосатым телом.

Пересаженная черная субстанция продуцирует до­фамин, который подается в неостриатум, что приво­дит к восстановлению нарушенных двигательных функций.

У крыс при пересадке им эмбриональной нервной ткани закладки черной субстанции в область хвоста­того ядра, после повреждения нигро-стриарных пу­тей, наблюдали врастание в хвостатое ядро катехола-миновых волокон, восстановление двигательных на­рушений, нормализацию поведения изменившихся в результате повреждения нигро-стриарных путей.

Пересадка эмбриональной ткани черной субстанции приводит к восстановлению концентрации дофамина в хвостатом ядре до 13-14% нормы, что вполне достаточ­но, так как уже 3% концентрации дофамина обеспе­чивает нормальную двигательную функцию неостриа-тума.

Трансплантация крысам с поврежденными и стрио-нигральными связями эмбриональной ткани черной субстанции в дорсальную область хвостатого ядра ус-

траняла двигательные нарушения, а трансплантация в вентральную область восстанавливала соматосенсор-ную функцию.

Компенсация нарушений двигательных функций при паркинсонизме у человека возможна не только в результате трансплантации черной субстанции, но и при аутотрансплантации хроматиновых клеток над­почечников в хвостатое ядро.

14.14.6. Восстановление функций спинного мозга

Повреждения и нарастающие сдавления спинного мозга, в зависимости от уровня локализации патоло­гии, вызывают парезы и параличи движений, нару­шения функций органов таза, регуляции дыхания.

Естественной регенерации поврежденного спинно­го мозга у высших млекопитающих не происходит, хотя некоторые клиницисты считают, что регенера­ция могла бы развиться, но ей мешают рубцовые из­менения в месте травмы.

Оказалось, что трансплантация в место поврежде­ния спинного мозга эмбриональной нервной ткани препятствует образованию рубца.

Пересадка в место повреждения спинного мозга сим­патического ганглия с сохранением его межганглио-нарных связей показала, что вокруг трансплантата усиливается регенерация интраспинальных волокон, возрастает дифференцировка синапсов, улучшается васкуляризация поврежденного сегмента, ограничива­ется образование рубцовой ткани. Однако полного вос­становления нарушенных функций не происходит.

Исследования возможности восстановления спин­ного мозга методом трансплантации эмбриональной ткани свидетельствуют, что наиболее успешно восста­новление функции поврежденного спинного мозга происходит при пересадке в него эмбриональной тка-

ни голубого пятна или других холинергических струк­тур. Как правило, такие трансплантаты без рубцов сливались с тканью реципиента, аксоны их нейронов внедрялись в ткани хозяина, нейроны спинного моз­га прорастали в трансплантат своими аксонами.

Трансплантаты самых различных участков голов­ного мозга эмбрионов на спинной мозг крыс или в область рассеченного спинного мозга хорошо прижи­ваются, аксоны их клеток прорастают в спинной мозг. Трансплантат заполняет область дефекта спинного мозга и служит местом для роста через него перере­занных проводников спинного мозга. Такой подход лечения повреждений спинного мозга в настоящее время является единственно обнадеживающим.

14.14.7. Восстановление способности к обучению

Повреждение гиппокампа у животных вызывает на­рушения краткосрочной памяти, двигательную гипер­активность.

В гиппокампе заканчиваются холинергические во­локна из септума, голубого пятна, шва моста. Повреж­дение этих входов в гиппокамп нарушает поступле­ние в него ацетилхолина, серотонина, это приводит к ослаблению или полной утрате способности к обуче­нию ориентировочному поведению в лабиринте.

Пересадка эмбриональной ткани септума в гиппо­камп с поврежденными холинергическими входами приводила к тому, что способность к обучению вос­станавливалась, двигательная гиперактивность умень­шалась.

Особенно хорошо восстанавливалась двигательная активность после пересадки в гиппокамп эмбрионально­го голубого пятна. Вживление эмбрионального септума старым животным с затруднениями условнорефлектор-ного обучения улучшало у них способность к обучению.

В экспериментах с введением нейротоксина в нео-кортекс, снижающего уровень норадреналина и ис­следовательской активности животных, транспланта­ция таким животным эмбриональной ткани голубого пятна повышала уровень норадреналина и восстанав­ливала поведенческие реакции.

Вживление эмбриональной ткани лобно-теменной области животным с поврежденными затылочными областями мозга компенсировало у них зрительную функцию, однако трансплантация таким животным эмбриональной затылочной коры не восстанавливала зрения. В случаях повреждения лобной коры возни­кают грубые изменения познавательной способности. Пересадка таким животным эмбриональной ткани лоб­ной области мозга восстанавливала познавательную способность. При этом между тканями трансплантата и мозгом реципиента устанавливались прямые связи.