logo
сборник_2012_3 / СБОРНИК ДЕТСКИЙ

Стереотипные поведенческие реакции у крыс с различным

АНТИОКСИДАНТНЫМ СТАТУСОМ СЫВОРОТКИ КРОВИ

Манаенкова И. В., Кидун К. А.

Научный руководитель: зав. кафедрой патологической физиологии,

к.м.н., доцент Т. С. Угольник

Учреждение образования

«Гомельский государственный медицинский университет»

г. Гомель, Республика Беларусь

Введение

Согласно классическим представлениям, у крыс в тесте «Открытое поле» (ОП) проявляются ориентировочно-исследовательская и защитно-оборонительная поведенческие реакции. Как правило, ориентировочно-исследовательская реакция крыс оценивается по горизонтальной и вертикальной двигательной активности, времени реакции обнюхивания. Эмоциональный статус животного оценивают по числу болюсов, уринаций. груминговой активности, времени выхода из центра и времени замирания [1, 2, 3].

В настоящее время взаимосвязь между поведенческими реакциями и состоянием антиоксидантных систем организма изучена недостаточно. В последние годы наблюдается повышенный интерес к применению антиоксидантов для лечения различных заболеваний, постоянно накапливается информация о связи между развитием болезней человека и окислительным стрессом. Брюс Эймс ввел термин «окислительный стресс», под которым понимают нарушение динамического равновесия в системе «прооксидант-антиоксидант».

Цель

Изучить стереотипные поведенческие реакции у самцов белых беспородных крыс с различным антиоксидантным статусом сыворотки крови.

Материалы и методы исследования

Объектом исследования явились 50 половозрелых самцов белых беспородных крыс весом от 180 до 340 г. медиана составила 275 (240; 280) г. Крысы содержались на стандартном рационе вивария, с соблюдением режима светового дня по 5 животных в клетке. Эксперимент проводился в соответствии с требованиями и нормами гуманного обращения с животными.

Изучение стереотипных поведенческих реакций крыс проводили с использованием теста ОП. Животные помещались в равномерно освещенную прямоугольную установку размером 120×120 см. разделенную на 100 равных квадратов, 16 из них имели круглые отверстия. Центром поля считался квадрат со стороной 60 см. равноудаленный от границ установки. В течение 10 мин производилась видеорегистрация стереотипного поведения животного в условиях ОП. Тест проводили однократно для каждой крысы. Анализ видео проводился в условиях «ослепления» сотрудника, занимающегося расшифровкой. При анализе фиксировали показатели горизонтальной двигательной активности (пройденную дистанцию, продолжительность замирания), вертикальной двигательной активности (количество отрывов лап от пола, опор на стену, малых и больших грумингов), ориентировочно-исследовательской деятельности (количество обследованных отверстий, количество пересечений центра), вегетативного статуса (количество актов дефекации).

Уровень антиоксидантной активность сыворотки крови (АОАК) определялся по методу Т.В. Сироты (патент № 2144674 Россия 2000 г.) в модификации А. И. Грицука на кафедре биологической химии Гомельского государственного медицинского университета [4]. Забор крови производился при декапитации. Кровь центрифугировали.

Данные обработаны статистически с использование пакета прикладного ПО «Statsoft (USA) Statistica» v. 8.0. Для проведения анализа различий в двух независимых группах, по количественным показателям, распределение которых отличалось от нормального, использовали критерий Манна-Уитни (U; Z). Анализ взаимосвязи проводили с использованием коэффициента ранговой корреляции Спирмена (rs) и коэффициента детерминации (R2). Данные описательной статистики приведены в виде медианы и квартилей (Me (Q1;C3)). Нулевую гипотезу отклоняли при уровне статистической значимости р < 0,05 [5].

Результаты исследования

Параметры описательной статистики для выборки животных в целом приведены в таблице 1.

Таблица 1 — Стереотипные поведенческие реакции крыс при проведении теста ОП

Стереотипные поведенческие реакции

Me (Q1; Q3)

Пройденная дистанция, м

12,7 (5,80; 21)

Совокупное время замирания, с

118 (57; 211)

Выходов в центр, pas

1 (0; 1)

Отрыв лап от пола, раз

7 (2; 13)

Окончание таблицы 1

Стереотипные поведенческие реакции

Me (Q1; Q3)

Опора на стенку, раз

12 (5;23)

Малый груминг, раз

4 (1; 7)

Большой груминг, раз

0 (0; 1)

Обследовано отверстий

8 (4; 15)

Количество актов дефекации

1 (0; 2)

При проведении анализа различий между группами животных с антиоксидантной (группа 1) и прооксидантной активностью сыворотки крови (группа 2) статистических значимых различий по показателям геста ОП выявлено не было. При изучении взаимосвязи в целом по выборке между относительной скоростью аутоокисления адреналина в сыворотке крови крыс и стереотипными поведенческими реакциями теста ОП различий выявлено не было.

При внутригрупповом анализе взаимосвязи у животных с АОАК была выявлена тенденция к наличию статистически значимой прямой слабой силы взаимосвязи (rs = 0,296; р = 0,067) между количеством актов дефекации и скоростью аутоокисления адреналина.

При проведении корреляционного анализа в группах крыс с антиоксидантной и прооксидантной активностью сыворотки крови были выявлены симметричные статистически значимые взаимосвязи между отдельными стереотипными поведенческими реакциями теста ОП. Результаты приведены в таблице 2.

Таблица 2 — Взаимосвязи между стереотипными поведенческими реакциями в группах животных с различной АОАК

Показатели

Группа 1

Группа 2

rs

R2

Р

rs

R2

Р

Пройденная

дистанция, м

Количество выходов в центр

0,716

0,51

0,001

0,797

0,64

0,032

Количество обследованных

отверстий

0,790

0,62

0,001

0,955

0,91

0,001

Количество раз

опоры на стенку

Количество отрывов лап от пола

0,564

0,32

0,001

0,811

0,66

0,027

Совокупное время замирания, с

-0,645

0,42

0,001

-0,893

0,80

0,007

Заключение

Таким образом, результаты проведенного исследования свидетельствуют, что у беспородных белых крыс обследованной группы с различной АОАК стереотипные поведенческие реакции по тесту «открытое поле» статистически значимо не различаются.