2011_ОБЩАЯ МЕДИЦИНСКАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ

Запасные вещества прокариот

Запасное вещество	Структурные характеристики	Химический состав	Функции	Распространение
Гранулы гликогена	20–100 нм	высокомолекулярные полимеры глюкозы	источник углерода и энергии	широко распространены
Гранулы поли- β-оксимасляной кислоты	100–1000 нм; окружены однослойной белковой мембраной толщиной 2–3 нм	98% полимера поли-β-оксимасляной кислоты, 2% белка	источник углерода и энергии	широко распространены
Гранулы полифосфата	 500 нм, зависит от условий культивирования	линейные полимеры ортофосфата	источник фосфора и энергии	широко распространены
Гранулы серы	100–800 нм; окружены однослойной белковой мембраной толщиной 2–3 нм	включения жидкой серы	источник энергии	бактерии, окисляющие H₂S
Углеводородные гранулы	200–300 нм; окружены однослойной белковой мембраной толщиной 2–4 нм	углеводороды того же типа, что и в среде	источник углерода и энергии	представители родов Mycobacterium, Nocardia и другие, использующие углеводороды

Функции включений:

Трофическая: запасные вещества служат источником питательных веществ. Так, волютиновые гранулы коринебактерий дифтерии играют роль фосфатных депо, за счет которых клетка может при недостатке фосфора в среде осуществить еще несколько делений.
Энергетическая: запасные вещества служат источником энергии. Поэтому при отсутствии внешних источников энергии они могут продлить время существования клетки, а у спророобразующих видов — создать условия для образования спор.
Дифференциально-диагностическое значение у некоторых бактерий. Напр., зерна волютина обнаруживаются у возбудителя дифтерии (C. diphtheriae) и дифтероидов (C. xerosis, вызывающего конъюнктивиты, и C. ulcerans, вызывающего дифтериеподобные поражения кожи), но отсутствуют у непатогенных ложнодифтерийных палочек (C. pseudodiphtheriticum).

Выявление включений (зерен волютина):

Волютин проявляет хромофильность и метахромазию (имея щелочную реакцию, вопринимает кислые красители), легко выявляется в клетках в виде крупных гранул, особенно при специальных методах окраски. ЦП бактериальной клетки, обладая кислой реакцией, воспринимает щелочные красители.

Окраска по Леффлеру:

на фиксированный препарат наливают щелочной раствор метиленовой синьки на 3–5 мин;
промывают водой, высушивают, наносят иммерсионное масло, микроскопируют: палочки (протоплазма) окрашиваются в светло-голубой цвет, зерна волютина (гранулы полифосфата) — в темно-синий (рис. 28).

Рис.28.Окраска по Леффлеру

Окраска по Нейссеру:

на фиксированный препарат наливают уксусно-кислую метиленовую синьку на 1–2 минуты; краситель сливают, препарат промывают водой;
наносят раствор Люголя на 30–60 сек (иногда);
промывают водой;
докрашивают хризоидином 10–15 сек или везувином 30сек–3мин;
промывают водой, высушивают, микроскопируют: зерна волютина выявляются у дифтерийной палочки в виде интенсивно прокрашивающихся в темно-синий (без раствора Люголя) или черный (с раствором Люголя) цвет полюсов клетки; ЦП клетки окрашивается в нежно-желтый цвет (рис. 29).

Рис. 29.Окраска по Нейссеру

Окраска волютина флюорохромом корифосфином: в люминесцентном микроскопе бактерии желто-зеленые, зерна волютина —оранжево-красные.

Содержание