Кандидоз

Чаще всего кандидоз вызывается Candida albicans. Candida albicans — овальные, размно­жающиеся почкованием и спорообразованием дрожжеподобные грибы. В норме кандиды — представители резидентной микрофлоры слизистых оболочек, пищеварительного канала и женских мочеполовых органов. Кандидоз чаще всего регистрируют у больных с ослабленным иммунитетом.

Антитела к Candida albicans в сыворотке

Антитела к Candida albicans в сыворотке в норме отсутствуют. Диагностический титр антител больше 1:80.

Диагностика поверхностного кандидоза основана на обнаружении элементов гриба в окрашенном мазке. При висцеральных формах кандидоза большое диагностическое значе­ние имеют серологические исследования. Используют РСК и иммуноферментный метод. Антитела обнаруживают иммуноферментным методом более чем у 90 % больных уже в пер­вые 2 нед заболевания и у переболевших сохраняются до 5 лет. Для подтверждения диагноза важно следить за динамикой уровня антител, 4-кратный подъем титров антител между ост­рой и реконвалесцентной стадиями позволяет предполагать этиологию заболевания, 4-крат­ное снижение их уровня в процессе лечения является показателем успешной терапии заболе­вания. Серологическая диагностика при поверхностном кандидозе неэффективна, только тя­желые формы поражения кожи и слизистых оболочек сопровождаются повышением уровня антител.

25*

387

Определение антител к Candida albicans необходимо для диагностики кандидоза различ­ной локализации:

• гнойные воспалительные процессы;

• воспалительные заболевания легких;

• воспалительные заболевания глотки;

• воспалительные заболевания половых органов.

Антиген Candida albicans в сыворотке

Антиген Candida albicans в сыворотке в норме отсутствует.

Тест применяют для непосредственного выявления кандидозного антигена в крови больных с инвазивным кандидозом. Этот тест более специфичен, чем выявление антител. Величина >2 нг сывороточного кандидозного антигена при ИФА предполагает инвазивный кандидоз. Чувствительность метода у онкологических больных составляет 65—70 % при спе­цифичности 100 % [Тиц Н., 1997]. Для выявления антигена кандидоза в сыворотке исследо­вание рекомендуется проводить не реже 2 раз в неделю.

ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ (ПЦР) В ДИАГНОСТИКЕ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Полимеразная цепная реакция (ПЦР), являющаяся одним из методов ДНК-диагности­ки, позволяет увеличить число копий детектируемого участка генома (ДНК) бактерий или вирусов в миллионы раз с использованием фермента ДНК-полимеразы. Тестируемый спе­цифический для данного генома отрезок нуклеиновой кислоты многократно умножается (амплифицируется), что позволяет его идентифицировать. Сначала молекула ДНК бактерий или вирусов нагреванием разделяется на 2 цепи, затем в присутствии синтезированных ДНК-праймеров (последовательность нуклеотидов специфична для определяемого генома) происходит связывание их с комплементарными участками ДНК, синтезируется вторая цепь нуклеиновой кислоты вслед за каждым праймером в присутствии термостабильной ДНК-полимеразы. Получается две молекулы ДНК. Процесс многократно повторяется. Для диагностики достаточно одной молекулы ДНК, т.е. одной бактерии или вирусной частицы. Введение в реакцию дополнительного этапа — синтеза ДНК на молекуле РНК при помощи фермента обратной транскриптазы — позволило тестировать РНК-вирусы, например вирус гепатита С. ПЦР — это трехступенчатый процесс, повторяющийся циклично: денатурация, отжиг праймеров, синтез ДНК (полимеризация). Синтезированное количество ДНК иден­тифицируют методами иммуноферментного анализа или электрофореза.

В ПЦР может быть использован различный биологический материал — сыворотка или плазма крови, соскоб из уретры, биоптат, плевральная или спинномозговая жидкость и т.д. В первую очередь ЦПР применяют для диагностики инфекционных болезней, таких, как ви­русные гепатиты В, С, D, цитомегаловирусная инфекция, инфекционные заболевания, пере­дающиеся половым путем (гонорея, хламидийная, микоплазменная, уреаплазменная инфек­ции), туберкулез, ВИЧ-инфекция и т.д. ПЦР используют также для диагностики злокачест­венных заболеваний, например ретинобластомы, В-клеточной лимфомы. Этот метод реко­мендуется и для диагностики наследственных заболеваний, дородового определения пола плода, ДНК-дактилоскопии в криминалистике, проведения санитарно-гигиенических иссле­дований объектов питания и водоснабжения.

Преимущество ПЦР в диагностике инфекционных заболеваний перед другими метода­ми исследований заключается в следующем:

• возбудитель инфекции может быть обнаружен в любой биологической среде организ­ ма, в том числе и материале, получаемом при биопсии;

• возможна диагностика инфекционных болезней на самых ранних стадиях заболева­ ния;

• возможность количественной оценки результатов исследований (сколько вирусов или бактерий содержится в исследуемом материале);

• высокая чувствительность метода (достаточно для диагностики наличия 1—5 копий возбудителя в пробе).

388